RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。哪家有GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉(zhuǎn)染試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉(zhuǎn)染試劑進行優(yōu)化。.PEIMAX(MW40,000)為Polysciences公司生產(chǎn)的化合物產(chǎn)品,每批產(chǎn)品出廠前都經(jīng)過嚴格的檢測,保證每批產(chǎn)品都100%合格、穩(wěn)定且品質(zhì)高,但由于作為轉(zhuǎn)染試劑使用過程中有很多實驗室因素(配置方法,PH,水純度,稱量的準度,dnaRNA純度,細胞狀態(tài),細胞品系…)造成溶解出現(xiàn)問題或者轉(zhuǎn)染效率出現(xiàn)差異,所以廠家只受理該產(chǎn)品純度,分子量及重量缺失破損等相關投訴,針對極個別客戶溶解問題和轉(zhuǎn)染效率問題我們能友善解決。更多關于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!浙江高性價比PEI轉(zhuǎn)染試劑哪里有賣GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑?
瞬時轉(zhuǎn)染方法:1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。
線性PEI轉(zhuǎn)染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉(zhuǎn)染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉(zhuǎn)染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質(zhì)量控制每批次線性PEI轉(zhuǎn)染試劑均經(jīng)過轉(zhuǎn)染測試。將eGFP表達質(zhì)粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉(zhuǎn)染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀是什么原因?
注意事項質(zhì)粒質(zhì)量:請務必使用高質(zhì)量轉(zhuǎn)染級無內(nèi)質(zhì)粒(推薦使用QIAGEN或者MN公司去內(nèi)質(zhì)粒提取試劑盒)。通過260nm光吸收測定DNA濃度,260nm/280nm比值確定DNA純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內(nèi))。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質(zhì)粒的完整性。細胞條件:使用適當保存和經(jīng)常傳代的健康細胞。確保培養(yǎng)基沒有被細菌、或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉(zhuǎn)染前至少傳代兩次。建議使用GIBCO或者78bio公司血清培養(yǎng)細胞。PEI轉(zhuǎn)染試劑對復合物孵化的時間是有要求的,一般建議5~20分鐘之間。國產(chǎn)PEI轉(zhuǎn)染試劑好用么
如何辨別假的PEI轉(zhuǎn)染試劑?RNAPEI轉(zhuǎn)染試劑使用注意事項
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:
1.接種細胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。
2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。
3.轉(zhuǎn)染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉(zhuǎn)染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。
4.孵育細胞和分析結果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。
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上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司位于自由貿(mào)易試驗區(qū)達爾文路16幢104室,擁有一支專業(yè)的技術團隊。專業(yè)的團隊大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗,熟悉行業(yè)專業(yè)知識技能,致力于發(fā)展PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote的品牌。公司不僅*提供專業(yè)的生物醫(yī)藥科技(人體干細胞、基因診斷與zhiliao技術開發(fā)和應用除外)領域內(nèi)的技術開發(fā)、自有技術轉(zhuǎn)讓,并提供相關的技術咨詢和技術服務;計算機軟件的開發(fā)、設計、制作(音像制品、電子出版物除外)、銷售自產(chǎn)產(chǎn)品;實驗室試劑及耗材(藥品、危險品除外)、化工原料及產(chǎn)品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用baozha物、易制毒化學品)、儀器儀表、機械設備、電子設備、塑料制品、玻璃制品、辦公用品、電子產(chǎn)品的批發(fā)、進出口、傭金代理(拍賣除外)。【依法須經(jīng)批準的項目,經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】,同時還建立了完善的售后服務體系,為客戶提供良好的產(chǎn)品和服務。誠實、守信是對企業(yè)的經(jīng)營要求,也是我們做人的基本準則。公司致力于打造的血小板裂解液,WB自動孵育系統(tǒng),微流控器官芯片,藍牙無線標簽機。
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智能污水流量計出廠價
電磁流量計的電氣接口主要有以下幾種:1.信號輸出:電磁流量計的信號輸出接口通常有模擬信號輸出和數(shù)字信號輸出兩種。模擬信號輸出一般為4-20mA或0-10V,數(shù)字信號輸出一般為RS485或HART協(xié)議。 。
倉儲自動化管理系統(tǒng)方案:1、物料先進先出:傳統(tǒng)倉庫由于空間限制,將物料碼放堆砌,常常是先進后出,導致物料積壓浪費。自動化倉儲系統(tǒng)能夠自動綁定每一票物料的入庫時間,自動實現(xiàn)物料先進先出。2、作業(yè)賬實同步 。
開發(fā)新的應用領域,除了目前已經(jīng)應用于清潔劑、食品加工、醫(yī)學和環(huán)保等領域外,脂肪酶還有許多未被開發(fā)的應用領域,例如化妝品、藥物、石油化工等領域。未來,人們可以通過不斷的研究和開發(fā),拓展脂肪酶的應用領域。 。
模具制造管理軟件的人員管理功能是指通過軟件對模具制造企業(yè)的人員進行管理和調(diào)度。人員管理是模具制造企業(yè)的重要環(huán)節(jié),合理的人員管理可以提高生產(chǎn)效率和質(zhì)量,降低成本,保證生產(chǎn)進度的順利進行。人員管理功能主要 。
SMETA工廠認證怎么辦,Sedex工廠認證如何處理?SEDEX驗廠,SEDEX驗廠審核改怎么辦?SMETA工廠認證,Sedex工廠認證是一個比較復雜的流程,涉及到如何申請認證,現(xiàn)場整改,資料準備,現(xiàn) 。
PVC地板,即聚氯乙烯地板,是一種環(huán)保、經(jīng)濟實用的地板材料,因其具有良好的耐磨、防滑、防水和隔音等特性,被廣泛應用于家庭、商業(yè)、醫(yī)療、教育等領域。優(yōu)點:1.環(huán)保安全:PVC地板采用聚氯乙烯樹脂作為主要 。
在石油和天然氣行業(yè),由于高溫高壓、機械應力和腐蝕性物質(zhì)等因素,合金制造的正確性至關重要。小到每一根管道、每一個焊縫,接口和螺釘都必須準確,否則會危及整條管線或整個容器安全的情況。使用奧林巴斯手持合金分 。
磁懸浮空壓機在工業(yè)領域主要應用于氣體輸送,可在多個行業(yè)領域應用。1、物料氣體輸送:可用于水泥廠、化工、食品等行業(yè):應用場景為:工業(yè)原料、粉塵、食品等氣力輸送。2、污水處理市政、工業(yè)):可應用于向污水池 。
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雪崩光電二極管作為重要的光電轉(zhuǎn)換元件之一,在激光測距傳感器中發(fā)揮著重要的作用。首先,雪崩光電二極管能夠高效地將接收到的激光信號轉(zhuǎn)換為電信號。當激光束照射到目標物體并反射回傳感器時,雪崩光電二極管會將光 。
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